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微柱凝膠卡交叉配血試驗(yàn)常見問題及處理

微柱凝膠卡交叉配血試驗(yàn)的原理:在微柱凝膠介質(zhì)中,紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合,利用凝膠的空間位阻,經(jīng)低速離心,凝集的紅細(xì)胞懸浮在凝膠上層,而未和抗體結(jié)合的紅細(xì)胞則沉于凝膠底部(管底尖部)。 


微柱凝膠卡交叉配血試驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn):微柱凝膠實(shí)驗(yàn)(又名微柱凝膠血型卡法)有結(jié)果清楚明確、結(jié)果穩(wěn)定可保存、靈敏度高、特異性強(qiáng)、可標(biāo)準(zhǔn)化操作、自動化程度高、可檢出IgG抗體、標(biāo)本用量少、降低錯誤發(fā)生率的優(yōu)點(diǎn)。微柱凝膠卡交叉配血試驗(yàn)常見問題: 


1主側(cè)不凝集,次側(cè)凝集 


1.1微柱凝膠卡交叉配血試驗(yàn)如果主側(cè)不凝集,而次側(cè)凝集,原因有:①患者的紅細(xì)胞已經(jīng)包被了抗體(自身抗體,直接抗人球蛋白試驗(yàn)即DAT陽性反應(yīng))。最常見的原因是患者有免疫系統(tǒng)疾病、腫瘤以及骨科患者。②供血者血漿中存在針對患者紅細(xì)胞的抗體。③患者與供血者的ABO血型不合。 


1.2處理 


1.2.1患者紅細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗(yàn):患者05%紅細(xì)胞懸液50ul加入合血卡主側(cè)或次側(cè),立即離心5min(900rpm2min;1500rpm3min。程序已設(shè)置好。),取出肉眼判定結(jié)果。如果為陽性結(jié)果,則說明患者自身紅細(xì)胞問題,即患者紅細(xì)胞已被致敏,此袋血可以發(fā)出,但報(bào)告寫清楚:主側(cè)不凝集,次側(cè)凝集,患者紅細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽性,請緩慢輸注。 


1.2.2如果患者紅細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗(yàn)為陰性結(jié)果,則查找獻(xiàn)血員血漿中是否存在不完全抗體。用獻(xiàn)血員血漿作不完全抗體篩查試驗(yàn):08%標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞懸液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各50ul(1滴)加入相應(yīng)凝膠管中,再加獻(xiàn)血員血漿50ul,37℃孵育15min,離心5min(900rpm2min;1500rpm3min。程序已設(shè)置好。),取出肉眼判斷結(jié)果。如果為陽性結(jié)果,則說明獻(xiàn)血員血漿中存在不完全抗體,此袋血不能發(fā)出,必須換一袋血再重新合血 


1.2.3如果還查找不出原因,則請臨床重新抽取血液標(biāo)本,用新標(biāo)本重新合血。 


2主側(cè)凝集,次側(cè)不凝集 


2.1微柱凝膠卡交叉配血試驗(yàn)如果主側(cè)凝集,次側(cè)不凝集,原因有:①患者或供血者ABO定型不正確,或二者的ABO血型不配合。②某些亞型的特異性非常強(qiáng)。③患者血清中存在同種抗體,與供血者紅細(xì)胞上的相應(yīng)抗原發(fā)生了反應(yīng)。④供血者紅細(xì)胞上已經(jīng)包被了抗體。⑤患者血清不正常,患者剛輸注大分子藥物如右旋糖酐。 

2.2處理①重新鑒定血型,如屬血型錯誤,則重新用同型血合血。②如屬亞型,則此袋血不可以發(fā)出,必須換一袋血重新合血。③如果患者剛輸注大分子藥物如右旋糖酐,則立即停止輸注大分子藥物,2h后重新抽取血液標(biāo)本,重新合血。 


3主次側(cè)均凝集 


3.1微柱凝膠卡交叉配血試驗(yàn)如果主次側(cè)均凝集,原因主要是ABO血型的錯誤。 


3.2處理重新檢測受血者和獻(xiàn)血者的ABO血型(正反定型),必須用ABO、RHD血型定型試劑卡(單克隆抗體)(微柱凝膠卡)作血型鑒定,如果正反定型不符,要按相應(yīng)方法處理,直到結(jié)果能做出合理解釋為止。 


注意事項(xiàng):①抗人球蛋白凝膠合血卡必須標(biāo)注患者姓名和獻(xiàn)血員血袋號(后4位),一卡可以合三袋血。②微柱凝膠卡的準(zhǔn)備:合血前首先觀察微柱凝膠卡的外觀如有干膠、雜質(zhì)、氣泡不可使用,然后用專用離心機(jī)離心3~4min。③紅細(xì)胞懸液濃度不可太濃或太淡,應(yīng)以0.5%~0.8%為宜。④冬天可將生理鹽水37℃孵育后配紅細(xì)胞懸液,遇疑難情況,可用溫鹽水洗滌紅細(xì)胞后再作血型鑒定和合血。⑤血清、紅細(xì)胞懸液應(yīng)加至卡反應(yīng)室中。⑥可疑凝集時(shí),則再離心5min,再觀察結(jié)果。⑦血清或血漿標(biāo)本必須充分去纖維蛋白,否則標(biāo)本中纖維蛋白在微柱凝膠中析出,阻礙陰性紅細(xì)胞沉降,呈假陽性反應(yīng)或出現(xiàn)混合凝集。若血漿標(biāo)本上清液有絮狀物或顆粒,可將上清液再離心使纖維蛋白下沉。配紅細(xì)胞懸液時(shí)將吸頭申入管底部,避免吸入纖維蛋白。供血者血液標(biāo)本必須離心,合血管的血漿與紅細(xì)胞交界處含有較多纖維蛋白,應(yīng)把交界處剪掉。⑧某些疾病、藥物等可導(dǎo)致交叉配血不合,應(yīng)加以區(qū)別。⑨異常血清蛋白及細(xì)菌可影響結(jié)果。⑩微柱凝膠卡應(yīng)放在18~25℃儲存,應(yīng)注意防重物壓、防高溫。 


總之,微柱凝膠卡交叉配血試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)有不配合(一側(cè)凝集或兩側(cè)均凝集),首先應(yīng)考慮受血者和供血者的ABO定型是否有錯,必須重新鑒定血型,包括RH血型,必須做不規(guī)則抗體篩查試驗(yàn)。其次,應(yīng)注意有無特異性同種抗體、特異性未知的同種抗體存在。患者的血清若在室溫、37℃或抗人球蛋白中凝集所有其他紅細(xì)胞,造成交叉配血試驗(yàn)困難時(shí),應(yīng)及時(shí)請示上級主管或主任。必要時(shí)請求上級血液中心指導(dǎo)和解決問題。


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